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倒置显微镜、相差显微镜和荧光显微镜该如何选择

【概要描述】显微镜是细胞培养及相关衍生实验中非常重要的仪器。目前，市场上有各种类型的显微镜。对于刚刚入行的小白来说，选择一个符合需求、适用的是一个挑战。这里我们将介绍倒置显微镜、相差显微镜、荧光显微镜的原理供您选择。　

　　显微镜是细胞培养及相关衍生实验中非常重要的仪器。目前，市场上有各种类型的显微镜。对于刚刚入行的小白来说，选择一个符合需求、适用的是一个挑战。这里我们将介绍倒置显微镜、相差显微镜、荧光显微镜的原理供您选择。　　

　　1.倒置显微镜

　　与普通显微镜相比，倒置显微镜的物镜和照明聚光系统以载物台为轴颠倒，物镜在载物台下方，照明系统在载物台上方。采用这种结构，可以显著扩大照明聚光系统与载物台之间的有效距离，便于放置较厚的待观察器具，如培养皿、细胞培养瓶等。

　　由于倒置显微镜观察的材料一般是培养的细胞，透明度高，结构反差不明显，倒置显微镜往往配有相差物镜，实际上构成了倒置相差显微镜。

相差显微镜

　　2.相差显微镜

　　在相差显微镜检查时，只有当透射光的波长(颜色)和振幅(亮度)随周围介质发生明显变化时，才能用肉眼分辨出视场中的样品。当照明光通过无色透明的物体时，透射光的波长和振幅没有明显变化，尤其是振幅几乎不变。因此，当用普通的光学显微镜观察时，很难分辨这种物体的结构。需要通过固色、染色等物理化学方法，使样品的透射光与背景在波长或振幅上发生变化，即在颜色和亮度上存在差异，从而进行鉴别。

　　相差显微镜不同于普通的光学显微镜，装置中有四个必不可少的部件：相差显微镜(内部有相位板)、带环形光阑的转盘聚光镜、轴对准望远镜和绿色滤光片。关键是相位差物镜和环形光阑，更具体地说是相位板和环形光阑。光源产生的光通过环形光阑和聚光器形成环形光锥，照射待检物体，产生直射光和衍射光。两者分别经过相位板上的共轭面和补偿面，产生干涉。共轭面和补偿面上的镀膜可以使直射光和衍射光的相位分别滞后1/4.导致干涉光的振幅加强和减弱，从而产生亮反差和暗反差。从而即使被检测的物体没有被染色也可以被清楚地区分。

　　3.荧光显微镜

　　荧光显微镜用于研究细胞内物质的吸收和运输，化学物质的分布和定位等。荧光显微镜采用发光效率高的点光源，通过滤色系统发出一定波长的光(紫外光365nm或紫外蓝光420nm)作为激发光，激发标本中的荧光物质发出各种颜色的荧光，再通过物镜和目镜的放大观察。在这样强烈对比的背景下，即使荧光微弱，也容易识别，灵敏度高。主要用于细胞结构、功能和化学成分的研究。